Cromatografia liquida ad alte prestazioni (HPLC)

Sebbene l'elettroforesi a gel bidimensionale (2-DE) sia un metodo comunemente usato per analizzare l'intero proteoma, ha limitazioni come capacità di separazione limitata, effetto discriminatorio e procedure operative complicate. Spesso è difficile ottenere risultati soddisfacenti per l'analisi di grandi gamma dinamica, bassa abbondanza e proteine idrofobiche. ha usato hplc/spettrometria di massa per confrontare e analizzare l'espressione differenziale delle proteine pre-maligne e tumorali. La proteina è stata separata dall'HPLC, e le frazioni raccolte sono state identificate da MALDI-TOF-MS, in modo che la proteina sia stata analizzata quantitativamente nell'espressione differenziale dei due tipi di cellule. Come nuovo tipo di tecnologia di separazione, la cromatografia liquida multidimensionale non ha la limitazione della massa molecolare relativa e del punto isoelettrico. Attraverso la combinazione di diversi modi, elimina l'effetto discriminatorio dell'elettroforesi bidimensionale del gel. Ha le caratteristiche di alta capacità di picco e facile automazione. La cromatografia bidimensionale a scambio ionico inverso (2D-IEC-RPLC) è il sistema di separazione cromatografica liquida multidimensionale più comunemente usato nella ricerca sulla proteomica.